定量pcr試劑盒在分裝過(guò)程中，有著諸多需要嚴(yán)格把控的關(guān)鍵要點(diǎn)，以確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性，今天我們就帶大家來(lái)探討下：

　　1.環(huán)境的潔凈度至關(guān)重要

　　定量pcr對(duì)微量的核酸成分極為敏感，哪怕是極其微量的外源DNA或RNA污染，都可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差。所以，分裝應(yīng)在超凈工作臺(tái)或者潔凈的無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行，并且要保證操作空間在分裝前經(jīng)過(guò)充分的紫外線(xiàn)照射等消毒處理，防止空氣中的微生物、塵埃顆粒等污染物落入試劑盒內(nèi)，影響試劑的純度。

　　2.精準(zhǔn)的操作是核心要求

　　要使用經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)的、高精度的移液器來(lái)進(jìn)行分裝，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)上標(biāo)注的各個(gè)組分的體積要求進(jìn)行操作。比如，某種緩沖液需要準(zhǔn)確量取100微升，那就不能有絲毫的差錯(cuò)，因?yàn)槟呐挛⑿〉捏w積偏差，都可能改變反應(yīng)體系中各成分的濃度比例，進(jìn)而影響pcr反應(yīng)的擴(kuò)增效率、特異性等關(guān)鍵指標(biāo)。同時(shí)，移液器的槍頭要做到及時(shí)更換，避免不同組分之間出現(xiàn)交叉污染的情況。

　　3.試劑的穩(wěn)定性維護(hù)不能忽視

　　許多定量pcr試劑盒中的試劑對(duì)溫度、光照等條件比較敏感。在分裝時(shí)，要注意盡量縮短試劑暴露在室溫等不適宜保存溫度下的時(shí)間，對(duì)于一些需要低溫保存的試劑，如酶制劑等，最好在冰浴環(huán)境下進(jìn)行分裝操作，防止其活性因溫度升高而降低。而且，要避免試劑長(zhǎng)時(shí)間受到強(qiáng)光直射，防止因光照引發(fā)的成分分解或變性等情況。

　　4.分裝后的包裝與標(biāo)識(shí)需規(guī)范

　　應(yīng)選用合適材質(zhì)的、密封良好的容器進(jìn)行分裝后試劑的存放，如無(wú)酶無(wú)熱源的離心管等，并且在每個(gè)分裝容器上清晰標(biāo)注試劑名稱(chēng)、分裝日期、分裝人員等信息，方便后續(xù)使用時(shí)能快速了解試劑的相關(guān)情況，也便于溯源和管理。

　　定量pcr試劑盒的分裝工作是一項(xiàng)嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的操作過(guò)程，只有從環(huán)境控制、精準(zhǔn)操作、試劑穩(wěn)定性維護(hù)以及規(guī)范包裝標(biāo)識(shí)等多個(gè)方面都嚴(yán)格把關(guān)，才能保證分裝后的試劑盒在定量pcr實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮出應(yīng)有的作用，為科研、診斷等各項(xiàng)工作提供準(zhǔn)確可靠的檢測(cè)結(jié)果。